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骨骼肌无细胞基质的制备及其生物相容性研究

第一作者:田春祥 编号 : #68599#
2012-06-21
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田春祥    范雪娇  陈晓禾  邓力  秦廷武  罗静聪  李秀群  吕青

目的 细胞外基质是脂肪组织工程材料的研究热点之一。通过探讨骨骼肌无细胞基质的制作方法及生物相容性,为其在脂肪组织工程中的应用奠定基础。 方法 取健康成年小香猪新鲜骨骼肌组织,横切成厚2 ~ 3 mm 的组织块,采用低渗- 去垢剂法脱细胞处理。处理后采用HE 染色、Masson 三色染色、免疫组织化学染色及扫描电镜检测骨骼肌无细胞基质是否有细胞成分残留,并观察其基本结构;应用MTT 法检测骨骼肌无细胞基质细胞毒性。取乳腺癌患者自愿捐赠脂肪组织,分离培养人脂肪干细胞(human adipose-derived stem cells,hADSCs),从形态学、流式细胞学和成脂、成骨分化能力方面进行鉴定。将骨骼肌无细胞基质与第3 代hADSCs 共培养,于培养后第1、3、5、7 天通过细胞活性检测材料上细胞黏附、扩散和增殖情况,了解其与细胞之间的相互作用。 结果 HE、Masson、免疫组织化学染色及扫描电镜观察显示骨骼肌无细胞基质肌纤维去除完全,无细胞核残留,基质结构保留完整;大量连接成网状的胶原纤维呈多孔隙样结构,规则排列。MTT 检测示骨骼肌无细胞基质细胞毒性为1 级,细胞相容性好。细胞活性检测示hADSCs 在骨骼肌无细胞基质上能很好地伸展,且能与周围基质黏附,进入基质内部并相互交织。 结论 经脱细胞处理的骨骼肌无细胞基质具有良好生物相容性,可能作为脂肪组织工程的支架材料。


 

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