关节

王 剑   王 钢   段 妍   吕 龙   徐永胜   李柏涯

摘要 目的 研究糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs)对骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)增殖的影响及相关分子机制。方法 体外培养SD(Sprague-Dawley)大鼠骨髓MSCs, 流式细胞仪鉴定细胞表面的阳性指标(CD29 和CD90)和阴性指标(CD34 和CD45)。MTT 法检测不同剂量(0、25、50、100和200 μg/ml)终末期糖基化牛血清白蛋白(advanced glycation end productsbovine serum albumin, AGE-BSA)刺激骨髓MSCs不同时间(6 h、12 h、24 h)后MSCs的增殖变化。同时以200 μg/ml 的BSA 作为阴性对照, 以未经处理的骨髓MSCs 作为空白对照。用200 μg/ml 的AGE-BSA刺激骨髓MSCs 12 h和24 h后, 利用基因芯片检测相关基因表达变化。结果 AGE-BSA 可抑制骨髓MSCs 的增殖, 并呈剂量与时间相关性。与对照组相比, AGE-BSA 浓度为100 μg/ml 处理24 h 或浓度为200 μg/ml 处理12 h或24 h后, 骨髓MSCs 增殖活性明显下降, 差异具有统计学意义。基因芯片检测发现骨髓MSCs 在AGE-BSA作用12 h和24 h后均有17 个基因表达发生变化, 且两个时间点的差异基因相同, 其中表达上调基因12 个, 表达下调基因5 个。表达上调基因中包括4 个炎性因子(CCL3、CCL2、CCL4 和IL-1β)。结论 AGEs 可抑制骨髓MSCs的增殖, 此可能与糖尿病性骨质疏松症的发生密切相关。