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白血病抑制因子联合bFGF对人BMSCs增殖及分化的影响

第一作者:施剑明 编号 : #113530#
2014-11-12
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施剑明  曹俊  殷明  殷嫦嫦  程细高  谢荣辉  林思文  徐浚怀


  目的:研究白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)联合bFGF对人BMSCs(human BMSCs,hBMSCs)增殖及分化的影响。


  方法:取第4代hBMSCs,根据培养条件不同分为4组:A组为对照组,加入完全培养基(含10%FBS的α-MEM)常规培养;B组加入含10 ng/mL LIF的完全培养基;C组加入含10 ng/mL bFGF的完全培养基;D组加入含10 ng/mL LIF和10 ng/mL bFGF的完全培养基。采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)测定各组第4代hBMSCs生长曲线;倒置相差显微镜观察各组hBMSCs形态变化;流式细胞术检测各组第8代hBMSCs表面标志CD44、CD90、CD19、CD34表达情况。


  结果:4组细胞生长曲线均近似S形,且细胞增殖速率表现为D组> C组> B 组> A组。各组细胞形态观察发现A组细胞较早出现衰老和分化现象;B组细胞早期形态维持较好,但增殖相对缓慢,后期出现部分衰老细胞;C组少量细胞呈神经样细胞分化,但增殖较快;D组细胞增殖迅速,且能长期维持hBMSCs 形态特征。流式细胞术检测示,A、C组骨髓基质标志CD44、CD90表达较B、D组低;各组造血细胞标志CD19、CD34均呈阴性,组间差异不明显。


  结论:LIF联合bFGF不仅可以维持hBMSCs的多向分化潜能,而且能够促进其快速增殖。

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