脊柱

钟  林     张 辉    高维陆    尹宗生

目的 比较神经干细胞（neural stem cells，NSCs）单细胞与神经球移植治疗大鼠脊髓损伤（spinal cordinjury，SCI）的效果，研究两种NSCs 移植方法治疗SCI 的有效性。 方法 取成年SD 大鼠2 只，体外分离脊髓组织并行NSCs 培养，取第3 代细胞行Hoechst33342、巢蛋白染色及贴壁分化鉴定。另取成年SD 大鼠（体重230 ～ 250 g）60 只，随机分为3 组，每组20 只，采用改良Allen 法制备大鼠脊髓T10 损伤模型。各组分别于SCI 处缓慢注射5 μL 生理盐水（A组）、第3 代NSCs 单细胞（B 组）、第3 代NSCs 神经球（C 组）。分别于术前及术后3、7、14、21、28 d 采用BBB 行为功能评定量表评定各组大鼠后肢功能；术后各时间点取材行HE 染色和微管相关蛋白2（microtubule-associated protein 2，MAP-2）免疫组织荧光染色观察。 结果 经形态学观察及鉴定，所培养的细胞为NSCs。术后3 d 各组BBB 评分较术前显著下降，术后3、7 d 各组间BBB 评分比较差异均无统计学意义（P > 0.05）；随时间延长BBB 评分不同程度增加，术后14、21、28 d，B、C 组BBB 评分优于A 组，C 组优于B 组，比较差异均有统计学意义（P < 0.05）。HE 染色示C 组较A、B 组脊髓结构清晰，瘢痕形成少。MAP-2 免疫组织荧光染色示，术后3、7 d 各组间阳性细胞数比较差异均无统计学意义（P > 0.05）；术后14、21、28 d，B、C 组阳性细胞数显著多于A 组，C 组多于B 组，差异有统计学意义（P < 0.05）。 结论 采用NSCs 神经球移植较单细胞移植更明显促进NSCs 向神经元分化，更有利于SCI 后下肢功能恢复。