关节

黎逢峰 范存义 曾炳芳 张长青 柴益民
上海市第六人民医院（上海交通大学附属第六人民医院）骨科

目的 可知关节粘连是TGF-β1和FGF-2等刺激成纤维细胞增殖并分泌胶原蛋白的结果，该过程可能通过ERK2发挥作用，故推测抑制ERK2的表达或活性能抑制关节粘连形成，本研究中就此展开探讨。
方法 设计、构建4条ERK2 siRNA，其中ERK2 siRNA1能抑制住84%的ERK2（P < 0.01）表达，效率最高，用慢病毒包装后待用。培养并用TGF-β1和FGF-2刺激大鼠关节粘连带成纤维细胞，以模拟关节粘连形成，同时转染慢病毒/ERK2 siRNA1，用绿色荧光蛋白法检测其转染效率，用MTT法检测其对细胞增值的影响，用Real time-PCR和Western blot检测其对胶原蛋白分泌的影响，用流式细胞仪检测其对细胞凋亡的影响。在动物实验中构建大鼠右后腿膝关节粘连模型，并把慢病毒/ERK2 siRNA1注射入大鼠膝关节，用荧光素酶法检测其能否转染关节软组织，从肉眼和显微镜下观察其能否抑制关节粘连形成，用生物力学的方法检测膝关节屈曲挛缩角。
结果 慢病毒/ERK2 siRNA1能明显的抑制细胞的增值和胶原蛋白分泌，但不会导致其凋亡，并能高效率的转染关节软组织，相比对照组，关节内形成的粘连组织明显稀少，膝关节屈曲挛缩角减小（P < 0.05），所有动物一般情况和伤口情况良好。
结论 抑制ERK-2能抑制关节粘连形成，但不会导致明显的安全性问题，将来可以以ERK2为靶点开发抑制关节粘连形成的新药。

Kyewords:ERK2，关节粘连，小干扰RNA，慢病毒