期刊正文

摘要：  目的 构建沉默小鼠RANK基因的真核表达载体pSuper﹣shRANK，筛选沉默RANK的最佳干扰序列。 方法  针对小鼠RANK基因设计并合成3对干扰序列，将其连接到真核表达载体pSuper上，酶切及测序鉴定正确后命名为pSuper﹣shRANK，后将其用脂质体瞬时转染小鼠骨髓巨噬细胞，用荧光显微镜观察转染情况，用Real﹣time PCR和Western blot分析干扰效率。 结果 酶切分析与测序结果表明重组载体pSuper﹣shRANK构建成功，脂质体共转染后，Real﹣time PCR和Western blot分析结果显示shRANK﹣3干扰效果最好，干扰效率达88.7％，筛选出shRANK﹣3为最佳干扰序列。  结论 成功构建了沉默小鼠RANK基因的真核表达载体pSuper﹣shRANK；筛选出了沉默小鼠RANK的最佳干扰序列，为研究抑制该基因在破骨细胞分化及活化作用机制中奠定了基础。