最新进展

　　目的：研究小分子干扰RNA(siRNA)靶向沉默人骨肉瘤细胞(MG63)中乙酰肝素酶基因对于细胞增殖、侵袭和促进血管形成等活性的影响。

　　方法：根据siRNA 原理针对乙酰肝素酶mRNA设计短发卡状RNA(shRNA)，合成两条互补的寡核苷酸链，接入pGenesil质粒构建固定表达载体，瞬时转染入人骨肉瘤细胞(MG63)，分为空白对照组、空载体pGenesil 转染组、pGenesil-shRNA转染组三组，RT-PCR及Western blot法检测骨肉瘤细胞中肝素酶基因表达水平，MTT 增殖实验检测细胞的增殖情况，粘附实验和transwell小室实验检测细胞游走、侵袭能力，小管形成实验检测细胞分泌介质促进血管形成能力。

　　结果：转染后重组质粒转染组细胞的乙酰肝素酶mRNA 表达下降76.1%(P<0.01)，蛋白表达下降75.3%(P<0.01)，细胞增殖，粘附，侵袭及促进血管形成能力都有明显下降，有统计学意义。

　　结论：靶向乙酰肝素酶基因沉默可以有效抑制人骨肉瘤细胞体外增殖、粘附、侵袭和促血管形成能力。