一氧化氮通过影响细胞骨架及粘黏蛋白促进HaCat细胞迁移

    目的 探讨外源性一氧化氮(NO)对培养HaCat细胞迁移功能的影响及其可能机制。
    方法 以硝普钠(SNP)作为NO 的供体,按细胞培养液中不同浓度SNP 将实验分为5 组(0μmol/L、100nmol/L、1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L,),分别在体外创伤模型中划痕后6、12、24、48小时观察并计算hacat细胞迁移率,筛选出SNP最佳作用浓度及作用时间;在经过最佳作用时间及作用浓度处理细胞后,分别采用WB、PCR等方法检测β1整合素、RhoGTP酶的表达情况,并应用激光共聚焦观察细胞骨架的改变等。
    结果 体外迁移实验发现,10μmol/L的SNP处理细胞24小时后能显著促进HaCat细胞的迁移,其迁移率由对照组的63%增至86%;在mRNA 水平及蛋白水平发现β1整合素表达较对照组明显下降;Rho GTP酶表达较对照组上升;激光共聚焦显微镜显示,SNP处理后,HaCat细胞纤毛明显增多、胞内应力性纤维束增粗。
    结论 适宜浓度的外源性NO 可促进培养人表皮角质成型细胞的增殖及迁移,提示其可能在皮肤创面修复起着重要作用。其作用机制可能与β1整合素表达下降,细胞骨架的改变有关。