伴肌动蛋白相关锚定蛋白特异性siRNA筛选及效能评价

张竞    张颖   王良哲   孙其志   袁文

[摘要] 目的 设计、合成人伴肌动蛋白相关锚定蛋白（Nebulin related anchoring protein,NRAP）的特异性siRNA，转染人成纤维细胞筛选最佳干扰序列。方法 设计并合成4条针对NRAP的siRNA，以不同浓度转染人成纤维细胞。通过Western blot、RT-PCR法检测其对NRAP mRNA及蛋白表达的抑制效果。结果 siRNA 50mol/L及Lipofectamine2000 1€%el有较高的转染效率。4种siRNA干扰成纤维细胞24小时后，NRAP的mRNA及蛋白表达量均有显著下降，其中siRNA47抑制效果最为显著。结论 成功筛选出可有效抑制成纤维细胞NRAP表达的siRNA，为观察阻断NRAP表达后应力诱导OPLL细胞成骨的变化奠定了基础。