光动力治疗骨与软组织肉瘤的疗效及其机制

曾辉    周承豪    孙梦熊    王卓莹    尹飞    傅泽泽    华莹奇    蔡郑东

摘要： 目的 探讨血卟啉单甲醚介导光动力疗法(hematoporphyrin monomethyl ether induced photodynamic therapy,HMME-PDT)的抗肉瘤效应及其机制.方法 流式细胞仪检测骨肉瘤细胞和成肌细胞的胞内HMME摄取,MTT法检测骨与软组织肉瘤细胞存活率,流式细胞术检测骨肉瘤细胞凋亡率,Hoechst 33342染色法观察细胞凋亡,不可逆caspase通路抑制剂及坏死抑制剂检测PDT介导的细胞死亡形式,蛋白免疫印迹和免疫组化检测肿瘤细胞中caspase-1、-3、-6、-9、PARP蛋白相对表达量,测定瘤体体积及瘤重评估PDT的抗肿瘤效应,HE染色检测肿瘤组织形态学改变.结果 光敏剂HMME选择性的聚集于骨肉瘤细胞中,而正常细胞摄取较少,且骨肉瘤细胞的摄取呈孵育时间及浓度依赖性.HMME-PDT能显著杀伤骨与软组织肉瘤细胞.HMME-PDT可明显诱导贴壁及悬浮培养骨肉瘤细胞发生凋亡.Hoechst 33342染色可见典型的凋亡改变.凋亡是HMME-PDT介导的细胞死亡的主要形式,且与caspase依赖的凋亡通路密切相关.HMME-PDT可明显上调caspase-1、-3、-6、-9、PARP蛋白表达量.HMME-PDT组肿瘤体积及瘤重均较空白组明显减小,且肿瘤区域出现广泛坏死.结论 HMME-PDT能有效地抑制肉瘤生长,其抗肉瘤效应与caspase依赖的凋亡通路密切相关.