VEGF-C基因修饰的淋巴结移植促进淋巴内皮细胞再生的初步研究

陆南杭        张勇      冯自豪     亓发芝

摘  要: 目的 探讨采用VEGF-C基因修饰的淋巴结移植对移植淋巴结周围组织内淋巴内皮细胞再生的影响。 方法取成年雄性SD大鼠36只，体重200.1～271.5 g，选取一侧采用带血管蒂淋巴结同侧原位移植方法制备腋窝淋巴结移植模型后，随机分为两组（n=18），分别将1.5 × 108 PFU 带Flag标签的VEGF-C基因过表达腺病毒载体及空载腺病毒载体注射入实验组及对照组大鼠移植淋巴结中。术后3 d，免疫荧光染色观察淋巴结内带Flag标签蛋白的表达情况；术后1、2、4周，免疫荧光染色观察移植淋巴结周围组织内Prox-1蛋白的表达并计算其荧光密度值；术后2、4周，通过测定患肢皮下注射偶氮蓝后大鼠血液在620 nm波长下吸光度（A）值，观察淋巴回流功能改善情况，以正常大鼠（正常组）及淋巴结移植大鼠（空白对照组）作为对照。 结果术后3 d实验组及对照组移植淋巴结内均可检测到带Flag标签蛋白的表达。术后1、2、4周，实验组移植淋巴结周围组织内Prox-1蛋白荧光密度值呈进行性增加，且均明显强于对照组（P < 0.05）。正常组及空白对照组大鼠血液A值分别为0.539 ± 0.020及0.151 ± 0.007。术后2周实验组及对照组A值分别为0.170 ± 0.011及0.168 ± 0.010，4周时分别为0.212 ± 0.016及0.197 ± 0.006，均显著低于正常组（P < 0.05），但与空白组比较差异无统计学意义（P > 0.05）；实验组及对照组间比较，差异亦无统计学意义（P > 0.05）。 结论VEGF-C基因修饰的淋巴结移植能显著促进移植淋巴结周围组织内淋巴内皮细胞的再生，但在4周内不能改善大鼠患肢淋巴回流功能。