以骨基质明胶及软骨基质构建一体化纤维环-髓核双相支架的实验研究

伍耀宏  徐宝山  杨强  马信龙   夏群   李秀兰  胡永成  张杨  张春秋  许海委

摘　　要：目的以骨基质明胶和软骨基质构建一体化纤维环-髓核双相支架，并检测其理化性能及细胞相容性。方法制备中空骨基质明胶环，并注入脱细胞软骨匀浆，经冷冻干燥、交联后制备成一体化纤维环-髓核双相支架。行Hoeehst33258、天狼星红、HE染色，扫描电镜观察支架内部结构，检测支架孔隙率和吸水率，检测双相支架复水后的力学性能。分离山羊纤维环和髓核细胞，接种至双相支架的相应部位，体外培养48h，扫描电镜、活／死细胞染色评价支架与细胞的生物相容性。结果镜下Hoechst33258染色未见细胞残留，天狼星红染色阳性，HE染色示两部分结合紧密。扫描电镜可见支架呈多孔结构，孔隙相连通，纤维环相孔径为（401．4±13．1）μm，髓核相孔径为（112．4±21．8）μm。支架孔隙率为73．37％±2．56％，支架吸水率为655．7％±78．6％。支架压缩弹性模量为（49．06±15．57）kPa，小于正常椎间盘的（135．9±28．9）kPa，但在同一数量级。扫描电镜观察细胞黏附于支架表面，细胞周围有基质分泌，live／dead细胞染色示细胞在支架上活性良好。结论以天然骨基质明胶和软骨基质构建的一体化纤维环-髓核双相支架，无免疫原性，具有良好的孔径和孔隙率，支架两部分连接处结合紧密，在结构、生化成分及生物力学性能上与椎间盘组织相似，且具有良好的生物相容性。