兔脊索细胞体外培养及生物学特点观察

 丁凡       邵增务      熊蠡茗     蔡显义 

摘要：目的 建立体外兔椎间盘脊索细胞藻酸盐凝胶培养模型,观察脊索细胞形态及生物学特点.方法 采用胶原酶消化法及Percoll不连续密度梯度沉淀法体外分离收集原代椎间盘脊索细胞,于1.2％藻酸盐凝胶(低密度)中培养.倒置相差显微镜下观察细胞形态,经Ⅱ型胶原免疫荧光染色对细胞表型初步鉴定,并分别以细胞增殖和细胞毒性试剂-8(CCK-8)检测细胞在藻酸盐凝胶中的存活和增殖能力.结果 成功分离获得原代椎间盘脊索细胞,可稳定表达Ⅱ型胶原.原代脊索细胞在藻酸盐凝胶中生长良好,但增殖缓慢.结论 初步了解兔椎间盘脊索细胞体外生物学特性,为椎间盘退变机制及组织工程学髓核种子细胞的研究提供一定的实验依据.