NF-κB shRNA转染骨髓间充质干细胞对炎症因子的影响

吴颖星  杨卿  杨开祥  叶亚平  向威  郭风劲

目的  鉴定NF-κB/p65-shRNA质粒并转染入骨髓间充质干细胞，检测靶细胞在NF-κB通路激活时磷酸化NF-κB/p65的表达。

方法  用双酶电泳鉴定所得质粒。使用HP试剂将NF-κB/p65-shRNA质粒转染至小鼠BMSCs，在荧光显微镜下观察绿色荧光，并且以流式细胞术检测转染效率，最后以Western Blot检测转染后靶细胞在炎症环境下对磷酸化NF-κB/p65表达的抑制情况。

结果  NF-κB/p65-shRNA质粒酶切鉴定结果与预期一致；流式细胞术检测转染效率达到52.76%；Western Blot检测在炎症环境刺激下，转染后靶细胞磷酸化NF-κB/p65表达明显降低。

结论  成功将NF-κB/p65-shRNA质粒转染至BMSCs中并有效表达，为进一步实验通过BMSCs修复和重建骨关节炎患者的软骨组织奠定基础。