人羊膜上皮细胞移植治疗肝纤维化免疫大鼠

寻权　　罗宏武　　黄湘俊　　黄飞舟

　　目的:观察人羊膜上皮细胞（human amniotic epithelial cells，hAECs）在正常免疫大鼠体内存活、迁徙及对大鼠肝纤维化程度的影响，为hAECs应用于临床提供实验依据。

　　方法:10周龄雄性SD大鼠64只，体重220～280 g，随机分为4组，每组16只。A组为肝纤维化+细胞移植（移植细胞量4×106个）组，B组为肝纤维化+生理盐水组，C组为肝纤维化组，D组为空白对照组。移植后2周，取A组大鼠心、肝、脾、肾、肺、脑组织采用DNA-PCR法检测人Alu基因重复序列，免疫组织化学染色观察人白细胞抗原G（human leucocyte antigen G，HLA-G）表达，并比较各脏器阳性表达百分比（脾脏为细胞注入器官不纳入统计）；取各组肝组织，行HE染色观察并采用肝纤维化组织学半定量计分系统（SSS）行肝纤维化半定量分析，行TGF-β1免疫组织化学染色观察并行免疫组织化学评分（immunohistochemical score，ISH）；取各组血清行谷草转氨酶（aspartate transaminase，AST）、谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、白蛋白（albumin，ALB）浓度检测，定量分析大鼠肝纤维化程度。

　　结果:A组各脏器中人Alu基因重复序列及HLA-G均表达阳性，肝组织中阳性表达百分比显著高于其余组织，比较差异有统计学意义（P<0.05）。 A、B、C组肝纤维化组织学半定量计分分别为（10.47±3.20）、（13.84±3.46）、（13.85±3.16）分，A组显著低于B、C组（P<0.05）；B、C组间差异无统计学意义（P>0.05）。A、B、C、D组TGF-β1的ISH评分分别为（3.60±1.50）、（5.38±2.60）、（5.50±2.40）、（1.87±1.36）分，A、B、C组显著高于D组，A组显著低于B、C组（P<0.05）；B、C组间差异无统计学意义（P>0.05）。A、B、C组血清AST、ALT浓度显著高于D组，A组显著低于B、C组（P<0.05），B、C组间差异无统计学意义（P>0.05）；ALB浓度显著低于D组，A组显著高于B、C组（P<0.05）；B、C组间差异无统计学意义（P>0.05）。

　　结论:hAECs可在正常免疫大鼠体内存活，可缓解肝纤维化程度并改善血清肝功能指标。