应用基因芯片技术对激素性股骨头缺血性坏死差异表达基因筛选的初步研究

程相国　胡斌　盛加根　张长青

　　目的:通过与正常个体相比，应用基因芯片技术筛选激素性股骨头缺血性坏死（osteonecrosis of the femoral head，ONFH）差异表达基因。

　　方法:取3例激素性ONFH男性患者自愿捐赠的坏死股骨头组织，年龄分别为25、31、38岁；另1例正常股骨头组织取自因交通意外死亡的26岁健康男性捐献者尸体。4例标本进行HE染色，观察组织学形态；抽提标本总RNA，测定其纯度；并逆转录合成cDNA探针，与芯片杂交后获得荧光信号，分析ONFH骨组织与正常骨组织中差异表达的基因。

　　结果:正常股骨头组织可见完整骨单位由连续完整的板层骨构成，围绕血管呈同心圆排列，骨小梁陷窝内可见正常骨细胞；激素性ONFH标本可见髓腔内脂肪组织、脂肪细胞增多，并充填于髓腔，微血管受挤压，骨小梁内骨细胞数量减少，核染色质深染，细胞核固缩、裂解或消失，部分骨陷窝中骨细胞消失，骨小梁变细、稀疏、中断，单位视野内骨组织面积减小。总RNA抽提电泳图显示，4个样本总RNA 28S、18S的条带清晰，亮度比约为2∶1，提示总RNA质量好。基因芯片技术筛选出44条差异表达基因，其中上调基因28条，下调基因16条，涉及差异表达的基因归为7大类：细胞代谢基因、信号转导基因、基因与蛋白表达基因、细胞分裂基因、细胞防御基因、细胞结构/细胞运动基因以及未分类基因。

　　结论:应用基因芯片技术筛选出44条激素性ONFH差异表达基因，为进一步研究ONFH发病机制提供了依据。