组织工程骨膜及脱蛋白骨辅助支架修复兔桡骨大段骨缺损

拓振合　赵琳　王栓科　鲁永婷　任广铁　张苍宇　庾佳佳　孙瑞　汪静

　　目的:评价组织工程骨膜体内成骨修复兔大段骨缺损及同种异体脱蛋白骨（deproteinized bone，DPB）作为组织工程骨膜辅助支架材料的效果。

　　方法:分离培养1月龄新西兰大白兔BMSCs，以成骨诱导培养液诱导成骨分化后，与猪小肠黏膜下层（small intestinal submucosa，SIS）复合构建组织工程骨膜，扫描电镜观察细胞与SIS复合情况。取新鲜同种异体骨段细密打孔后进行脱蛋白处理，制成DPB支架材料。将组织工程骨膜呈“外套状”包被DPB，并用可吸收缝线捆扎制备组织工程骨膜/DPB复合体。取4月龄清洁级新西兰大白兔48只，随机分成A、B、C、D 4组（n=12），切除左侧桡骨干3.5 cm长骨段制作大段骨缺损动物模型。A、B、C组分别于骨缺损处植入组织工程骨膜、DPB和组织工程骨膜/DPB复合体，D组骨缺损旷置。术后4、8、12周各组随机取4只动物行X线片观察及评分；术后8周各组随机处死4只动物，取骨缺损区标本行HE及Masson染色观察。

　　结果:扫描电镜观察构建的组织工程骨膜示SIS上黏附大量细胞。X线片检查示术后各时间点A、C组新生骨组织量明显多于B、D组。术后各时间点A、C组X线片评分显著高于B、D组，A组高于C组，B组高于D组，差异均有统计学意义（P < 0.05）。组织学观察示A组骨缺损处为大量新生骨组织，新生骨组织中可见不规则髓腔样结构及丰富的血管腔；B组骨缺损处见植入的DPB，DPB降解不明显；C组骨缺损处见较多新生骨组织，新生骨组织中可见呈岛状分布的DPB，DPB降解明显；D组骨缺损处仅见少量胶原纤维。

　　结论:以SIS和BMSCs构建的组织工程骨膜可修复兔桡骨大段骨缺损；DPB不能对组织工程骨膜成骨起到理想的支架作用，组织工程骨膜辅助支架材料有待进一步探索。