负载浓度梯度NGF的周围神经导管修复大鼠周围神经缺损的实验研究

林 强    蔡杨庭    李皓莘

     目的:探讨以浓度梯度方式负载NGF的周围神经导管修复大鼠周围神经缺损的效果。

     方法:采用聚己内酯-丙交酯嵌段共聚物制备周围神经导管。取10 μg NGF溶解于1 mL 3%丝蛋白溶液中，采用直接浸泡或用微量注射泵按3.2 μL/min注入方式，分别制备均匀负载及浓度梯度负载NGF的周围神经导管。采用ELISA试剂盒检测两种导管12周NGF累积释放量。取雄性成年SD大鼠24只，体重220～250 g，制备右侧坐骨神经14 mm缺损模型。根据修复方法不同，随机分为4组（n=6）：A、B、C、D组分别采用单纯周围神经导管、均匀负载NGF的周围神经导管、浓度梯度负载NGF的周围神经导管、自体神经修复缺损。术后观察大鼠一般情况，12周取材行大体观察、电生理检测、组织学观察及透射电镜观察，分析神经再生情况。

     结果:浓度梯度负载及均匀负载NGF的周围神经导管12周内NGF累积释放量分别为（14.2 ± 1.4）、（13.7 ± 1.3）ng/mg，差异无统计学意义（t=0.564，P=0.570）。大鼠均存活至实验完成，术后4 d出现足底部溃疡，12周时基本愈合；其中C、D组大鼠愈合情况优于A、B组。术后12周，A组复合肌肉动作电位显著低于B、C、D组，B组显著低于C、D组（P < 0.05）；C、D组间差异无统计学意义（P > 0.05）。组织学及透射电镜观察示，C组轴突密度显著高于A、B、D组（P < 0.05）；D组轴突总数、轴突直径及肌纤维横截面积显著高于A、B、C组， C组高于A、B组（P < 0.05）；C、D组髓鞘厚度比较，差异无统计学意义（P > 0.05），但均优于A、B组（P < 0.05）。

     结论:负载浓度梯度NGF的周围神经导管修复大鼠坐骨神经缺损效果与自体神经修复接近，可促进坐骨神经再生、再生神经纤维排列规律化、提高再生神经髓鞘化、加速再生神经功能重建。