流体剪切应力对晚期内皮祖细胞生物学功能的影响

成敏    尹青令  崔晓栋   张晓芸  李鑫   李宏   官秀梅  王建英

     目的:研究流体剪切应力处理对晚期内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）体外及体内生物学功能的影响。

     方法:密度梯度离心法分离大鼠骨髓单核细胞，应用EGM-2MV进行体外培养。以3~4代的EPCs，即晚期EPCs为靶细胞，对其施以1.2 Pa剪切应力处理。采用EdU标记技术、黏附能力测定实验、改良的Boyden小室、Annexin V/PI、β半乳糖苷酶检测法、Matrigel法、荧光定量RTPCR等方法分别检测剪切应力对晚期EPCs增殖、黏附、迁移、凋亡、衰老、体外成血管及VEGF mRNA表达等生物学功能的影响。应用大鼠颈动脉损伤模型及细胞原位移植等实验手段检测剪切应力预处理对晚期EPCs修复受损内皮的影响。

     结果: 1.2Pa剪切应力处理可不同程度提高晚期EPCs的增殖、黏附、迁移及成血管能力（P＜0.01），上调VEGF的基因表达，抑制晚期EPCs的衰老及凋亡（P＜0.01）；移植经剪切应力预处理的晚期EPCs可加速损伤内皮的修复，减缓内膜的增生。

     结论: 流体剪切应力可改善晚期EPCs的功能活性，提高晚期EPCs修复损伤血管内皮的能力，这为EPCs的临床应用及剪切应力介导的细胞疗法提供了实验依据。